过柱的实验方法和技巧(doc20)

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过柱的实验方法和技巧
常说的过柱子应该叫柱层析分离，也叫柱色谱。我们常用的是以
硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多，所
以下面我就几年来过柱的体会写些心得，希望能有所帮助。
一：柱子可以分为：加压，常压，减压
压力可以增加淋洗剂的流动速度，减少产品收集的时间，但是会
减低柱子的塔板数。所以其他条件相同的时候，常压柱是效率最
高的，但是时间也最长，比如天然化合物的分离，一个柱子几个
月也是有的。
　 减压柱能够减少硅胶的使用量，感觉能够节省一半甚至更多，
但是由于大量的空气通过硅胶会使溶剂挥发（有时在柱子外面有
水汽凝结），以及有些比较易分解的东西可能得不到，而且还必
须同时使用水泵抽气（很大的噪音，而且时间长）。以前曾经大
量的过减压柱，对它有比较深厚的感情，但是自从尝试了加压后，
就几乎再也没动过减压的念头了。
　 加压柱是一种比较好的方法，与常压柱类似，只不过外加压
力使淋洗剂走的快些。压力的提供可以是压缩空气，双连球或者
小气泵（给鱼缸供气的就行）。特别是在容易分解的样品的分离
中适用。压力不可过大，不然溶剂走的太快就会减低分离效果。
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个人觉得加压柱在普通的有机化合物的分离中是比较适用的。
二：关于柱子的尺寸
应该是粗长的最好。柱子长了，相应的塔板数就高。柱子粗了，
上样后样品的原点就小（反映在柱子上就是样品层比较薄），这
样相对的减小了分离的难度。试想如果柱子十厘米，而样品就有
二厘米，那么分离的难度可想而知，恐怕要用很低极性的溶剂慢
慢冲了。而如果样品层只有 0.5 厘米，那么各组分就比较容易得
到完全分离了。当然采用粗大的柱子要牺牲比较多的硅胶和溶剂
了，不过这些成本相对于产品来说也许就不算什么了（有些不环
保的说，不过溶剂回收重蒸后也就减小了部分浪费）。
　 现在见到的柱子径高比一般在 1：5～10，书中写硅胶量是样
品量的 30～40 倍，具体的选择要具体分析。如果所需组分和杂
质分的比较开（是指在所需组分 rf 在 0.2～0.4，杂质相差 0.1
以上），就可以少用硅胶，用小柱子（例如 200 毫克的样品，用
2cm×20cm 的柱子）；如果相差不到 0.1，就要加大柱子，我觉得
可以增加柱子的直径，比如用 3cm 的，也可以减小淋洗剂的极性
等等。
三：关于无水无氧柱
适用于对氧，水敏感，易分解的产品，可以湿柱，也可以干柱。
不过在样品之前至少要用溶剂把柱子饱和一次，因为溶剂和硅胶